试管科普之辅助孵化技术——胚胎宝宝的破壳之路

1978年，世界上首例“试管婴儿”——路易丝·布朗出生了。10年后, Cohen教授等人首次对IVF体外受精（in vitro fertilization, IVF）的胚胎实施了“辅助孵化（assisted hatching, AH）”，辅助孵化后的胚胎移植回母体获得了成功妊娠。到现在，试管婴儿在胚胎移植前，有部分患者也会收到一份“胚胎辅助孵化技术知情同意书”，有人可能会有很多疑问：“辅助孵化有什么作用？对胚胎是否有伤害？为什么别人的胚胎不用做辅助孵化？”我们今天就来谈谈辅助孵化究竟是怎么回事儿吧！

一.什么是辅助孵化？

辅助孵化技术：Assisted Hatching，英文缩写为AH，指利用物理或化学的方法人为地对胚胎透明带进行处理（切口、削薄、打孔等）使透明带变薄或破损，从而帮助胚胎从透明带内孵出，促进胚胎植入子宫内膜，提高胚胎着床率，增加“试管婴儿”成功率的一项技术。为了更好地理解辅助孵化，我们再来认识一下透明带吧。

二.什么是透明带？

透明带是包裹在卵细胞外的一层透明的非细胞基质，主要由硫酸化糖蛋白构成。透明带为双层结构，外层较厚，内层较薄且富有弹性，胚胎从卵子到受精卵，到发育成胚胎都在这个外壳中进行。透明带具有特殊的功能。

透明带功能

（1）卵细胞和早期胚胎的保护屏障，保护胚胎的完整性，利于胚胎在输卵管运输，免受微生物和免疫细胞的攻击。

（2）受精时，帮助卵子识别精子。

（3）受精过程中，只允许单精子通过，避免多精受精。

三.辅助孵化的原理

胚胎发育至第五天或第六天形成囊胚，在囊胚阶段，透明带随着囊胚的扩张变薄直至破裂，胚胎就从这个裂口里孵化出来，在子宫内膜定位、黏附、侵入等，实现着床。这个时候如果胚胎本身有点弱，或者透明带太厚太硬等等各种因素使胚胎没有能够从透明带里孵出来，就会失去着床机会。

多项研究表明胚胎不能从透明带中孵化出来，是造成胚胎植入失败高的原因之一。如果对体外受精的胚胎进行辅助孵化(即人为地在透明带上开口，或使其变薄)，将有有利于胚胎从透明带内“破壳”而出，有助于提高胚胎的植入率。

被削薄透明带的胚胎（相比于透明带完整的胚胎而言），能够较早的孵化，减少了活力较差的胚胎完成孵化过程中所需要的能量，从而促进胚胎与子宫内膜较早接触，进而有利于完成着床。另外，辅助孵化后的胚胎，因为透明带变薄，可能会更有利于胚胎内外代谢产物和营养物质的相互交换，从而提升胚胎的发育潜能和提高囊胚形成率；辅助孵化使孵化提前，胚胎与子宫内膜接触较早，使胚胎发育和子宫内膜尽可能达到同步化，实现妊娠。

四.辅助孵化的方法

目前，辅助孵化的方法主要有：机械法、酸化法、酶解法、激光法等。

机械法：Cohen最早使用的部分透明带去除法。

化学法：通常使用酸性Tyrode溶液溶解透明带。

激光法：接触式/非接触式激光法，目前常规操作方法。

酶法：pronase酶，37℃作用1分钟使透明带变薄。

目前国内外生殖中心主要采用的是激光辅助孵化技术，它的优势是操作简单、方便，操作时间短，定位准确，胚胎暴露时间短，即保存了透明带对早期胚胎的支持保护作用，又使胚胎易于自然孵出。

五.辅助孵化的适应症

国内外大量研究多年的临床经验表明，辅助孵化技术的临床应用确实能够使部分患者受益，但也不是适合所有患者，一般来说辅助孵化的具体指征有以下几点：

1、高龄女性或（和）基础FSH水平升高的患者，一般存在透明带变厚变硬或孵化异常的情况

2、卵细胞透明带增厚或透明带异常，通过辅助孵化技术可以将透明带变薄

3、在试管婴儿治疗中反复着床失败者，考虑可能是孵化异常造成

发育至第二或第三天的早期冻融胚胎，这部分的胚胎在冻融过程可能会导致透明带变硬。而如果是第五第六条的囊胚，因为这个时期的胚胎透明带会随着囊腔的形成变大变薄，便无需进行辅助孵化。